1990年施兆鹏研究了黑茶制造过程中多酚氧化酶的变化 , 结果表 明杀青后同工酶由6条减为2条 , 至渥堆开始时这两条同工酶也消失 , 渥堆12小时有新的同工酶出现 , 作者认为这是微生物分泌出多酚氧化酶的结果[69] 。
1988年屠幼英测定了多酚氧化酶同工酶的等电点[70] , 1991年 又测定了各同工酶分子量74] 。 1990年谭振初[71],刘仲华[69]各自独立地证明柠檬酸可促使多酚氧化酶活化 。 稍早一些时候Tocklai试验站Choughurry M.提出果胶质和果胶酶能抑制 PPO活性(51) 。
1990年屠幼英、吴小崇证实萎凋时可溶性PPO活性下降 , 而PPO总酶活性上升 , 但这种变化与失水无关 , 萎凋中确有新的同工酶出现 , 已糖激酶能够促进萎凋叶多酚氧化酶活性的提高而抑制鲜叶多酚氧化酶的活性[72] 。 1991年屠幼英总结了PPO抑制剂的类型 , 有硼砂 、酚类、亚硫酸钠、Vc、半胱胺酸、二乙基二硫代硫酸钠等[70] 。 80年代以来多酚氧化酶同工酶在茶树育种和生理上的应用取得显著进展 。 前苏联学者曾提出PPO活力和PPO酶蛋白含量可作为发酵力的指标[76] , 我国学者龚景文、陈兴琰(1988)研究了若干茶树品种POD、PPO以及酯酶同工酶的差异 , 认为同工酶可作为品种分类的依据[77] 。 浙江农业大学茶学系(1988)建立了同工酶数据处理方法(76 ) 。 黄惠华(1991)研究了PPO的等电点 , 发现叶与花的同工酶等电点 基本无 异 , 可以视为遗传特征[76] 。
1983年鸟屋尾忠之等人研究了PPO与茶树遗传的关系 , 认为PPO至 少受两组基因的控制 , 作者估算了PPO广义遗传力和狭义遗传力的大小[79] 。
1987年杨跃华研究了同工酶变化与茶抗逆的关系 , 认为逆境下茶树各酶系统包括PPO都有新的同工酶产生[79] , 唐继平(1987)[81] , Stephen SN/(1990)[88]研究了杂交后代PPO遗传的关系 , 指出PPO主要受优势亲本的左右 。
1992年Singh HP研究了花器中多酚氧化酶的变异 , 结果表明整个花期中PPO在花器中的分布及同工酶特征都保持稳定 , 因此花器中PPO的特征可作为选种的依据[89] 。
1993年王利琴用圆盘电泳分析了PPO同工酶与遗传的关系[82] 。 新近奚彪等提出用基因工程方法改变茶树体内PPO存在状态的设想[95] 。
虽然已可以肯定红茶的变色过程中微生物不起主要作用 , 但微的可能作用仍不应忽视 。
1973年富金原考由绿茶分离出两种产PPO菌株 , 枝孢霉(Alternarlla Tennis)和链孢霉(Cladosposium C.)[87] , 苏联学者也分离到两株高产菌:Mac eiliair , Corioulous Hirsutu[83 , 86]
。 1987年加藤和冈本顺子研究了微生物PPO用于茶发酵的可行性[84]
。 1992年印度学者从茶树叶片中分离出具有较高PPO的活性的7株真菌 和3株细菌 , 并认为细菌更有前途[95] 。 1990年施兆鹏在研究黑茶渥堆中的PPO活性变化时也曾推测微生物在渥堆叶中分泌了多酚氧化酶[69] , 所有这些研究为微生物在茶叶制造中的作用提供了新见解 。
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